Transmission of caprine arthritis encephalitis virus between sheep / Transmissão do vírus da artrite encefalite caprina entre ovinos

ABSTRACT: This study was conducted to evaluate caprine arthritis encephalitis virus (CAEV) transmission among sheep using 15 lambs that were distributed in 2 experimental groups. The exposed group consisted of 10 lambs that remained with their mothers, who were experimentally infected with CAEV. The non-exposed group was characterized as the control group and was comprised of 5 lambs that remained with their CAEV-negative mothers. Blood samples were collected monthly from birth until 1 year of life. To evaluate the transmission, an agar gel immunodiffusion test (AGID), enzyme immunoassay (ELISA), immunoblotting (IB), and nested polymerase chain reaction (nPCR) techniques were used. The non-exposed group was negative in all of the tests throughout the whole experiment. In the exposed group, 2 individuals had positive nPCR results. Positive nPCR samples were sequenced for comparison with the original goat strains and were shown to be similar to the CAEV-Cork strain. Seroconversion was not detected, and clinical manifestations were not observed. Thus, after 1 year of observation, it was verified that CAEV transmission among sheep is possible; however, with discreet frequency. This was an initial study, and other experiments are needed to analyze the adaptive capacity of the CAEV to remain in an infected sheep flock and cause the disease.

RESUMO: O estudo foi conduzido para avaliar a transmissão do vírus da artrite encefalite caprina (CAEV) entre ovinos, utilizando 15 cordeiros, distribuídos em dois grupos experimentais. O grupo exposto foi constituído por 10 cordeiros, mantidos com suas mães, que foram infectadas, experimentalmente, com CAEV. O grupo não exposto caracterizou-se como grupo controle e foi formado por cinco cordeiros, mantidos com suas matrizes, negativas para CAEV. Foram colhidas amostras de sangue mensalmente, do periodo que compreende o nascimento até um ano de vida. Para avaliar a transmissão, foram utilizadas as técnicas de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), ensaio imunoenzimático (ELISA), immunoblotting (IB) e reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nPCR). O grupo não exposto se manteve negativo aos testes durante todo o experimento. Já no grupo exposto, dois indivíduos apresentaram resultados positivos na nPCR. As amostras positivas na nPCR foram sequenciadas para serem comparadas com as cepas originais de caprinos, comprovando se tratar de lentivírus semelhante à cepa CAEV-Cork. A soroconversão não foi detectada e a manifestação clínica não foi observada. Sendo assim, após um ano de observação, verificou-se que a transmissão do CAEV entre ovinos é possível, entretanto, com discreta frequência. Este foi um estudo inicial, e outros experimentos são necessários para analisar a capacidade adaptativa do CAEV de permanecer em rebanho ovino infectado e, com isso, causar doença.

Use of serological diagnostic techniques in the control and eradication of caprine arthritis encephalitis: an update / Uso de técnicas sorológicas de diagnóstico no controle e erradicação da artrite encefalite caprina: atualização

Caprine arthritis encephalitis (CAE) is a chronic disease caused by a small ruminant lentivirus (SRLV), which causes significant losses in goat breeding. The actual state of animal infection with SRLV is difficult to determine due to a complex pathogenesis of the virus, including factors such as delayed or intermittent seroconversion in serological tests. Several serological techniques are available for disease diagnosis, such as screening or confirmation tests, which are different in sensitivity and specificity. Regarding the choice of the test to be applied, availability of commercial immunoreagents, team training, antigen used, and cost of techniques must be considered. This review presents the serological methods available for use in different stages of CAE control and eradication programs, and management measures to be adopted in conjunction with serological diagnosis of the disease...

A artrite encefalite caprina (CAE) é uma enfermidade crônica causada por um lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), que ocasiona perdas significativas na caprinocultura. O estado real da infecção animal pelo LVPR é de difícil determinação em virtude da complexa patogenia do vírus, incluindo fatores como soroconversão tardia ou intermitente em testes sorológicos. Para o diagnóstico da enfermidade, diversas técnicas sorológicas estão disponíveis, como testes de triagem ou confirmatórios, com variações na sensibilidade e especificidade. Para escolha do teste a ser usado, a disponibilidade de imunorreagentes comerciais, o treinamento da equipe, o antígeno utilizado, e o custo das técnicas devem ser considerados. Esta revisão apresenta os métodos sorológicos disponíveis para uso em diferentes fases dos programas de controle e erradicação da CAE e as medidas de manejo que devem ser adotadas em conjunto com o diagnóstico sorológico da enfermidade...

Padronização do Elisa indireto e Western Blot para diagnóstico da artrite-encefalite caprina / Standardization of indirect Elisa and Western Blot for diagnosis of Caprine Arthritis-Encephalitis

A artrite-encefalite caprina (CAE) é diagnosticada rotineiramente pela técnica de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), que é considerada pouco sensível. Objetivou-se com este estudo padronizar testes de Elisa-i e Western Blot (WB) para diagnóstico precoce de anticorpos em caprinos contra CAEV e comparar os resultados obtidos nesses testes com a prova de IDGA. Para a padronização dos testes Elisa-i e WB, utilizaram-se diferentes concentrações e diluições de antígeno, soros e conjugado. No Elisa-i, adotaram-se microplacas rígidas com 96 poços, sendo a combinação de concentração de 0,5µg/poço de antígeno e diluições de 1:100 de soro e 1:1500 de conjugado a que apresentou melhor resultado. No WB foram utilizadas membranas de nitrocelulose, definindo-se as diluições de 1:50 de soro e 1:15000 de conjugado. Para avaliar o desempenho das técnicas, 222 amostras de soro caprino foram testadas e os dados obtidos foram comparados com o IDGA. A sensibilidade e a especificidade do Elisa-i/IDGA, WB/IDGA e WB/Elisa-i foram de 70% e 91%, 100% e 72,6%, 84,6% e 76,5%, concomitantemente. O índice Kappa desses testes foi de 0,35, 0,2 e 0,36, respectivamente. As técnicas de Elisa-i e WB apresentaram-se mais sensíveis que a IDGA, podendo ser utilizadas como ferramentas para o diagnóstico precoce da CAE...

Caprine arthritis-encephalitis (CAE) is routinely diagnosed with the Agarose Gel Immunodiffusion (AGID) technique, which is considered to have low sensitivity. The objective of this study was to standardize testing i-Elisa and Western Blot for early detection of antibodies against CAEV in goats and compare the results obtained in these tests with proof of AGID. For standardization of i-Elisa and WB, different concentrations and dilutions of antigen, sera and conjugate were used. In the i-Elisa, rigid microplate with 96 wells was adopted, and the combination that showed the best result was a concentration of 0.5µg/ well of antigen and dilutions of the serum of 1:100 and conjugate of 1:1500. In the WB nitrocellulose membranes were used, and the dilutions of the serum were defined at 1:50 and conjugate at 1:15000. To evaluate the performance of the techniques, 222 goat serum samples were tested and the data were compared with the AGID. The sensitivity and specificity of Elisa-i/IDGA, WB/AGID and WB/Elisa-i were 70% and 91%, 100% and 72.6%, 84.6% and 76.5%, concomitantly. The Kappa index of these tests was 0.35, 0.2 and 0.36, respectively. The i-Elisa and WB techniques were more sensitive than the AGID and can be used as tools for early diagnosis of CAE...

Inquérito soroepidemiológico do lentivírus caprino e perfil das criações de caprinos na região do Baixo Médio São Francisco (BA) / Seroepidemiological survey of caprine arthritis encephalitis and profile of goat breeding systems in the region of Baixo Médio São Francisco (BA)

This work aimed to determine the serological prevalence of caprine artrithis encephalitis (CAE) in the microregion of Juazeiro, in the state of Bahia, using the technique of agar gel immunodiffusion (AGID) to characterize the farming systems of the region. We collected 693 blood serum samples of goats from 46 farms in 8 different locations belonging to the municipalities forming the microregion (Campo Alegre de Lourdes, Casa Nova, Curaçá, Juazeiro, Pilão Arcado, Remanso, and Sobradinho). During the visits, a questionnaire was applied emphasizing information related to health management. All of the visited properties had extensive breeding systems, with predominance of mixed breed animals, low productivity and low technology rate, aiming mainly to use the meat. The main diseases reported were caseous lymphadenitis, diarrhea, ectoparasites and keratoconjunctivitis. Concerning seroprevalence, 0.29% (2/693) of samples tested positive for AGID. The positive animals belonged to the same property in the municipality of Curaçá, which showed 12.5% (1/8) of positive properties, in contrast to 2.17% (1/46) of total seroprevalence in the other visited properties. These results therefore suggest the need for new epidemiological surveys in the region, especially at a time when the importation of animals for genetic improvement is taking place.

Este trabalho teve como finalidade verificar a prevalência sorológica da lentivirose caprina (LVC) na microrregião de Juazeiro, na Bahia, por meio da técnica de imunodifusão em gel de agar (IDGA), bem como caracterizar os sistemas de criação da região. Para tal, foram avaliadas 693 amostras de soros sanguíneos de caprinos de 46 propriedades rurais em diferentes localidades, pertencentes aos 8 municípios formadores da microrregião (Campo Alegre de Lourdes, Casa Nova, Curaçá, Juazeiro, Pilão Arcado, Remanso, Sento Sé e Sobradinho). Na realização das visitas, aplicou-se um questionário com ênfase nas informações referentes ao manejo sanitário. Das propriedades visitadas, todas apresentavam sistema de criação extensivo, com predomínio de animais sem raça definida, baixa produtividade e baixo índice de tecnificação, visando principalmente à obtenção de carne. As principais enfermidades relatadas foram linfadenite caseosa, diarreias, ectoparasitoses e ceratoconjuntivite. Quanto à soroprevalência, 0,29% (2/693) das amostras apresentaram sorologia positiva para a LVC. Os animais positivos pertenciam à mesma propriedade, no município de Curaçá, que apresentou 12,5% (1/8) de propriedades positivas, contrastando com 2,17% (1/46) de soroprevalência total dos rebanhos visitados. Estes resultados sugerem, portanto, a necessidade da efetivação de medidas preventivas na região, principalmente [...]

Occurrence of antibodies against Maedi-Visna in Santa Inês sheep in the State of Sergipe, Brazil / Ocorrência de anticorpos contra o virus Maedi-Visna em ovinos Santa Inês, no Estado de Sergipe, Brasil

Small Ruminant Lentiviruses (SRLV) are infectious diseases of viral etiology caused by retroviruses, characterized for being a slowly progressive degenerative disease. The aim of this study was to determine the occcurrence of antibodies against lentivirus in the flock of Santa Inês sheep in Sergipe, Brazil. A minimum number of samples was analyzed by the Astudillo calculation, with an expected prevalence (p) of 10%, error rate (;) of 20% and confidence level of 95% (g = 1.96) obtaining the minimum number of samples (n) of 861. Finally, 941 serum samples were collected, derived from 54 properties and 19 municipalities distributed in three regions of the State, and the number of collected samples was proportional to the sheep flock of each municipality. The serum was placed at -20°C until the Agar Gel Immunodiffusion test (AGID), and results considered as positive or suspicious in AGID were assessed by the Western blotting technique. Out of sampled animals, 194 (20.62%) were male and 747 (79.38%) were female. From the stratification by age, 300 were young sheep (31.88%), aged between six months and one year old, 308 (32.73%) were young adults, aged between 1 and 3 years old, and 333 (35.39%) were estimated to be older than three years old. Results showed that antibodies against the Maedi-Visna virus in the sheep flock occcurred in the State of Sergipe at low frequency (0.11%). Thus, the occcurrence of Maedi-Visna infection in sheep in the State of Sergipe is reported, and emphasizes the participation of the transit of animals in the epidemiology of the disease.

As Lentiviroses de Pequenos Ruminantes (LVPR) são enfermidades infecciosas de etiologia viral causadas por retrovírus, caracterizadas por uma doença de degeneração progressiva e lenta. O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos contra o lentivírus no rebanho ovino Santa Inês, de Sergipe. Para analisar o número mínimo de amostras utilizou-se o cálculo de Astudillo, com prevalência esperada (p) de 10%, margem de erro (;) de 20% e grau de confiança de 95% (g = 1,96), obtendo-se o número mínimo de amostras (n) de 861. Foram colhidas 941 amostras de soro ovino oriundas de 54 propriedades e 19 municípios distribuídos nas três mesorregiões do Estado, sendo o número de amostras proporcional ao efetivo ovino do município. O soro foi acondicionado a -20°C até a realização do teste de Imunodifusão em Gel de Ágar (IDGA). Os resultados considerados positivos ou suspeitos na IDGA foram reavaliados através da técnica de Western blotting. Dos animais amostrados, 194 (20,62%) eram machos e 747 (79,38%) eram fêmeas. Quanto à estratificação por idade, 300 ovinos eram jovens (31,88%), entre seis meses e um ano, 308 (32,73%) eram jovens adultos, entre 1 e 3 anos, e 333 (35,39%) tinham idade estimada superior a 3 anos. Os resultados obtidos demonstraram que anticorpos contra o vírus Maedi-Visna (MVV) ocorrem no rebanho ovino do estado de Sergipe em baixa frequência (0,11%). Assim, relata-se a ocorrência da infecção por Maedi-Visna em ovinos no estado de Sergipe e ressalta-se a participação do trânsito de animais na epidemiologia da doença.